Клевер (Экстракт Клевера красного)

Экстракт Клевера красного (Промензил или Менофлавон) содержит изофлавоны, в том числе изофлавоны сои в малых количествах и некоторые структуры, сходные с биоханином A; используется для лечения симптомов менопаузы, Клевер красный обладает минимальной и пока недостоверной пользой для улучшения здоровья и снижения приливов.

Экстракт Клевера красного означает любой экстракт, полученный из растения Клевер красный, ботаническое название Клевер луговой, которое является богатым природным источников молекул изофлавонов. Существует несколько торговых названий экстракта Клевера красного (Промензил, Менофлавон и пр.) с содержанием отдельных изофлавонов, которые считаются биоактивными веществами, главным образом это относится к двум изофлавонам сои, которые также были обнаружены в данном растении (генистеин и дайдцейн), и двум структурно аналогичным метилированным изофлавонам, биоханину A и формононетину. Например, биоханин A является просто метилированным генистеином (и может вырабатывать генистеин в организме при приеме), тогда как формононетин представляет собой метилированный дайдцейн (также может вырабатывать дайдцейн в организме после приема). Экстракт Клевера красного и коммерческие препараты с его содержанием рекомендуются для лечения симптомов менопаузы или астмы. При обзоре исследования по изучению экстракта Клевера красного и симптомов менопаузы наблюдается действительная польза в отдельных исследованиях относительно плацебо, но также существует много исследований, в которых данного эффекта не удалось обнаружить, что указывает на то, что практически недостоверно, что пищевая добавка приносит пользу при данных симптомах; частично это может быть обусловлено разным уровнем всасывания или просто потенциальной необъективностью промышленности (поскольку многие исследования с использованием коммерческих продуктов и независимые исследования имеют тенденцию к отсутствию значительной отмеченной пользы). Однако может наблюдаться минимальное снижение тревожности, что может являться заметной пользой и требует дальнейших исследований. Также следует отметить, что в большинстве исследований отмечается значительная польза при приеме пищевой добавки, но эффект плацебо per se является весьма выдающимся в исследованиях по изучению симптомов менопаузы (показательным примером являются исследования цимицифуги, в которых один плацебо иногда вполовину снижал симптомы менопаузы). Кроме упомянутого возможного анксиолитического действия Клевер красный, который требует дальнейшего изучения, и возможной пользы при лечении астмы и кашля (это заявление также требует проведения дополнительных исследований), вероятно, не имеет значительной пользы, связанной с приемом его экстракта. Другие названия: Клевер луговой, биоханин A, формононетин, промензил (торговое наименование), менофлавон (торговое наименование).

Дозировка экстракта Клевера красного составляет предположительно 40 мг изофлавонов один раз в день или два раза в день, всего 80 мг в день. Этого можно достичь: • приемом чистых изофлавонов (в этом случае диапазон доз будет 40-80 мг); • приемом коммерческих препаратов, таких как Промензил, который содержит 40 мг изофлавонов на капсулу 500 мг (около 8% изофлавонов по весу); • приемом около 5 грамм целого растения без получения экстракта.

Экстракт Клевера красного относится к растению, известному как Клевер луговой (семейства Бобовые), который широко известен за счет содержания в нем биоханина A, эстрогенного биофлавоноида. Продается в виде травяного чая (высушенные и заваренные в виде чая цветки) или в виде пищевой добавки для лечения симптомов менопаузы¹⁾, поскольку пищевые изофлавоны в целом (обычно из сои) связаны со снижением приливов, а биоханин A может превращаться в изофлавоны сои. По имеющимся данным это растение не используется в традиционной медицине, хотя чай из надземных частей растения является средством от кашля и бронхита. Клевер луговой, известный как Клевер красный, используется как пищевая добавка, благодаря высокому содержанию изофлавонов. Этот клевер не является традиционным медицинским средством, хотя и применяется в народной медицине для лечения кашля.

Компоненты экстракта Клевера красного:

• Биоханин A (4′-O-метилированный генистеин) и два гликозида биоханина A с общим содержанием агликонов биоханина A 0,009-0,116% (цветки), 0,022-0,095% (стебель), 0,067-0,339% (корень) и 0,077-0,133% (листья)²⁾
• Формононетин (4′-O-метилированный дайдцейн) и его гликозид (ононин), а также дигликозиды с общим содержанием агликонов формононетина 0,018-0,038% (цветки), 0,027-0,056% (стебель), 0,023-0,151% (листья) и 0,019-0,096% (корень)
• Все три изофлавона сои (дайдцейн, глицетин и генистеин) и их гликозиды (дайдцин, глицитин, генистин соответственно). Генистеин (в общем количестве агликонов) больше всего содержится в корнях (0,1-0,58%), в других частях растения не обнаруживается, дайдцейн присутствует в относительно малых концентрациях (менее 0,1%) во всех частях растения, а глицитеин также главным образом содержится в корнях (0,319-0,863%), но также в листьях (0,430-0,820%) и стеблях (0,219-0,729%)
• Каликозин (также обнаруженный в Астрагале перепончатом) и его гликозид с общим содержанием агликонов каликозина 0,066-0,126% в листьях по сухому весу, 0,054-0,084% в стеблях, 0,06-0,184% в корнях и 0,021-0,039% в цветках
• Гликозиды пратензеина с общим содержанием агликонов пратензеина 0,043-0,074% (листья), 0,009-0,029% (стебель), 0,034-0,062% (корень) и 0,006-0,01% (цветки)
• Прунетин и два его гликозида с общим содержанием агликонов прунетина в листьях 0,149-0,282%, в стебле 0,133-0,235%, корнях 0,133-0,288% и цветках 0,036-0,052%
• Псевдобаптигенин и два его гликозида с общим содержанием агликонов псевдобаптигенина в листьях 0,029-0,372%, в стебле 0,069-0,585%, корнях 0,056-0,126% и цветках 0,009-0,018%
• Ирилон (изофлавон с катехоловой группой на кольце C) и как минимум четыре его гликозида с общим содержанием агликонов 0,121-0,167% (цветки), 0,038-0,169% (стебли), 0,017-0,021% с выбросом при 0,907% (корни) и 0,532-0,737% с аналогичным выбросом при 0,02% (листья)

Клевер красный является достаточно богатым источником общих изофлавонов, наибольшее количество которых содержится в листьях и корнях (удивительно, что не в цветках) и распределяет изофлавоны в большей степени, чем биоханин A в большой дозировке. Общее количество изофлавонов находится в диапазоне 0,307-0,633% в цветках, 0,740-1,850% в стебле, 1,36-2,853% в корнях и 1,75-2,272% в листьях. Эти количества намного выше, чем в других видах клевера (Trifolium), таких как Клевер белый (Клевер ползучий) с содержанием 0,0213-0,0354%, клевер гибридный (Клевер шведский) с содержанием 0,0070-0,0431% и клевер полевой (Trifolium campestre) с содержанием 0,00028-0,00061%. Клевер красный содержит большее общее количество изофлавонов, чем другие виды клевера.

Промензил® представляет собой торговое наименование экстракта клевера красного с содержанием биоханина A, формононетина, генистеина и дайдцейна. Данная пищевая добавка производится компанией Novogen Ltd. (Австралия), которая представляла собой источник финансирования и играла основную роль в большинстве исследований с использованием промензила³⁾, также в многочисленных источниках перечислено содержание в капсулах 40 мг:

• 26 мг биоханина A, 16 мг формононетина, 1 мг генистеина и 500 µг дайдцейна (43,5 мг изофлавонов на капсулу 40 мг)
• 25 мг биоханина A, 8 мг формононетина, 4 мг генистеина и 5 мг дайдцейна (42 мг изофлавонов на капсулу 40 мг)

Таким образом, в целом считается, что более двух третей пищевой добавки по весу представлены двумя изофлавонами, которые преобладают в экстрактах клевера красного (биоханин A и формононетин), в то время как изофлавоны сои проявляются в меньшей степени. Другой продукт этой компании, Римостил® (28,6 мг изофлавонов), преимущественно содержит формононетин (25 мг, 87%) с некоторым количеством биоханина A (2 мг, 7%) и следовые количества изофлавонов сои. Изофлавоны представляют собой агликоновые формы (без сахара), и каждые 40 мг изофлавонов (в капсуле 500 мг) получены из 5 грамм растения Клевер красный⁴⁾. Существует две формулы, производимые одной компанией, которые являются только стандартизованными формами изофлавонов в клевере красном, и эти конкретные формулы используются в большинстве исследований по изучению экстракта Клевера красного. Существует еще одна формула с содержанием изофлавонов Клевера красного, называемая MF11RCE (также известная как Менофлавон®⁵⁾), которая, как отмечается, снижает вагинальную сухость у женщин с постменопаузой и обладает эстрогенными свойствами согласно оценке кариопикноза, кератинизации и показателя зрелости палочкоядерных гранулоцитов. Большинство исследований, в которых отмечался эстрогенный (или андрогенный) эффект, связанный с изофлавонами клевера красного, использовали эту формулу, но точная причина этому и как эта формула отличается от промензила/римостила неизвестно. MF11RCE (Менофлавон®) представляет собой еще один препарат, используемый в некоторых исследованиях, которые, как минимум с участием человека, поддерживаются индустрией, в которой производится данный препарат. Странно только, что этот препарат (но не вышеупомянутые) обладает эстрогенным действием неизвестного характера.

У людей, принимавших активную дозу изофлавонов (40-80 мг ежедневно) в течение пяти недель, отмечалось общее увеличение всасывания на 25%. Метилированные изофлавоны всасываются и (согласно метилированию) могут слегка лучше всасываться, чем их неметилированные формы генистеин и дайдцейн; хотя всасывание все еще не является оптимальным.

Биоханин A способен метаболизироваться (деметилирование) в генистеин, один из изофлавонов сои, in vitro способом, опосредованным широким диапазоном энзимов P450, в том числе CYP1A2, CYP2E1, CYP2C91, CYP2C19 и CYP2D6⁶⁾. Биоханин A также может гидроксилироватся для получения других метаболитов, в том числе 5,7,3'-тригидрокси-4'-метоксиизофлавона, 5,7,8-тригидрокси-4'-метоксиизофлавона и 5,6,7-тригидрокси-4'-метоксиизофлавона. Метаболизм биоханина A в генистеин после перорального приема у человека также происходит, но не полностью. Формононетин (7-гидрокси-4'-метоксиизофлавон) способен метаболизироваться (посредством гидроксилирования) в 6,7-дигидрокси-4'-метоксиизофлавон, 7,8-дигидрокси-4'-метоксиизофлавон и 7,3'-дигидрокси-4'-метоксиизофлавон в зависимости от места гидроксилирования; формононетин может также деметоксилироваться с помощью CYP1A2, CYP2C91, CYP2A6, CYP2D61 или CYP2C19 до формы без дайдцейна и подобно биоханину A метаболизм до формононетина не составляет 100%. Два основных компонента экстракта Клевера красного могут метаболизироваться с помощью энзимов CYP в печени и кишечнике для образования в организме изофлавонов сои, или они могут гидроксилироваться для получения другого пула потенциальных метаболитов.

При пероральном приеме 80 мг изофлавонов экстракта Клевера красного (соотношение биоханина A и формононетина 3,5:1) отмечалось выведение с мочой компонентов в диапазоне 18,9 ± 23,6 мг ежедневно, предполагая очень высокую вариабельность между пациентами. Выведение с мочой метилированных изофлавонов различается у разных пациентов, что, вероятно, связано с различными уровнями компонентов в сыворотке крови за счет разницы во всасывании.

Биоханин A ингибирует ароматазу при IC50 25 µМ в фибробластах с эффективностью, сравнимой с кверцетином (30 µМ), но меньшей чем для генистеина или хризина (3,6 и 1,5 µМ соответственно), в дальнейших исследованиях наблюдался меньший эффект, чем для гесперитина и мирицетина при исследовании на клетках плаценты, где биоханин A имел значение IC5010,2 µг/мл (по сравнению с 1,0 и 5,6 µг/мл для двух упомянутых выше веществ соответственно)[21]. Этот диапазон эффективности сравним с другими исследованиями с использованием биоханина A in vitro. В раковых клетках молочной железы MCF-7aro и SK-BR-3 биоханин A подавляет промотор 1.3 и активность II (25-50 µМ), что приводит к снижению мРНК ароматазы и уровня протеина; это может быть связано с метаболизмом до генистеина. Ингибирование ароматазы было подтверждено для внепеченочной ткани при использовании биоханина A и формононетина, поскольку эти два биофлавоноида периферически метаболизируются с помощью CYP1B1 или CYP1A1 в изофлавоны сои, которые затем ингибируют активность обоих энзимов. Было отмечено, что биоханин A подавляет уровень ароматазы и транскрипцию, а также напрямую ингибирует ее активность; однако относительно других биофлавоноидов эффект был ниже и не показал себя как практически релевантный после перорального приема.

В исследовании клинического случая было отмечено, что Клевер красный вызывает симптомы метотрексатной токсичности у лиц, принимающих метотрексат в высоких дозировках, предполагая взаимодействие лекарственных препаратов, увеличивающее уровень препарата в крови⁷⁾; возможные объяснения этому включают ингибирование эффлюксных переносчиков лекарственных препаратов (главным образом OAT3, MRP3, BCRP⁸⁾) или печеночную альдозоредуктазу, которая метаболизирует метотрексат в 7-гидроксиметотрексат (7-33% пероральной дозировки метотрексата). Потенциальное взаимодействие с метотрексатом, который имеет низкий терапевтический индекс и более чувствителен к нежелательному взаимодействию между лекарственными препаратами, при пероральной приеме пищевой добавки с содержанием клевера красного в одном исследовании клинического случая; необходимо проведение дополнительных исследований.

В одном исследовании с использованием экстракта Клевера красного в дозировке 398 мг (120 мг изофлавонов) ежедневно в течение одного года женщинами с постменопаузой было отмечено, что прием пищевой добавки был связан со снижением тревожности через один год, но не через три месяца, и без улучшений других симптомов менопаузы. Позднее эти результаты были дополнены при исследовании приема пищевой добавки с содержанием 80 мг изофлавонов (MF11RCE), но в течение 90 дней, исследование спонсировалось вышеупомянутыми производителями пищевой добавки, но прием добавки не был связан со значительным снижением тревожности, оцененной по Госпитальной шкале тревоги и депрессии, достигая снижения 76,9% вместе со снижением симптомов депрессии (оценка по той же шкале, а также по шкале Занга для самооценки депрессии) на 78,3-80,6%. Эффект потенциального снижения тревожности и депрессии в менопаузе, хотя в одном исследовании с потенциальным конфликтом интересов отмечается намного больший эффект (снижение около 80%), чем в независимом исследовании (в котором не отмечались антидепрессантные эффекты, а улучшение симптомов тревожности было минимальным); требуются дополнительные исследования для точного определения величины эффекта. Эти эффекты представляют собой что-то вроде влияния на качество жизни женщин с постменопаузой, так в одном исследовании при приеме 80 мг изофлавонов ежедневно в течение 90 дней отмечалось значительное улучшение самооценки настроения (по 100-балльной визуальной аналоговой шкале улучшение достигало 66-68 пунктов, в то время как для плацебо 8-15)⁹⁾, хотя в последнем исследовании по оценке качества жизни с помощью опросника оценки качества жизни в период менопаузы отмечалось, что снижение было меньше и незначительно отличалось от плацебо. Подобно симптомам тревожности качество жизни улучшается при приеме экстракта Клевера красного, хотя степень эффекта разнообразна, требуется проведение дополнительных исследований.

У женщин с постменопаузой старше 60 лет, принимавших римостил (экстракт изофлавонов, богатый формононетином) ежедневно в течение шести месяцев наблюдалось улучшение при проведении теста на конструирование блоков по сравнению с плацебо (зрительно-пространственное мышление) с ухудшением результатов при проведении теста числовых интервалов и вербальной памяти, а большинство других параметров когнитивной деятельности не подверглись влиянию. Экстракт Клевера красного, богатый формононетином, показал одновременно положительный (зрительно-пространственное мышление) и отрицательный (кратковременная память) эффекты на когнитивную деятельность у женщин с постменопаузой.

Прием 40-80 мг изофлавонов Клевера красного в течение пяти недель женщинами с менопаузой, не имеющими иных заболеваний, увеличивал податливость сосудистых стенок до 23% по результатам ультразвукового исследования без изменений артериального давления. Эти результаты были позднее расширены и артериальная ригидность была измерена повторно, изофлавоны Клевера красного снова были способны снижать ригидность (по оценке податливости сосудистых стенок и скорости распространения пульсовой волны) без влияния на кровообращение (согласно оценке вазодилатации, опосредованной кровотоком) и артериальное давление. Однако в одном исследовании, в котором отмечалось увеличение кровотока, при приеме 50 мг изофлавонов Клевера красного (преимущественно формононетин) женщинами с постменопаузой и диабетом II типа, что совпадало со снижением артериального давления¹⁰⁾. Возможно увеличение податливости сосудистых стенок (реактивности), что может снизить риск сердечнососудистых осложнений, но прием, вероятно, не связан с изменениями кровотока или давления, а вместо этого более тесно связан со снижением артериальной ригидности; механизмы, лежащие в основе данного эффекта, еще не изучены.

Было отмечено, что формононетин сам по себе способен снижать концентрацию молекул адгезии сосудистого эндотелия 1 типа в крови на 11% по сравнению с плацебо у женщин с менопаузой и пожилых мужчин. Было отмечено, что прием пищевых изофлавонов негативно связан с концентрацией гомоцистеина в сыворотке крови у женщин в пременопаузе¹¹⁾, но при исследовании ежедневного приема 86 мг экстракта Клевера красного не наблюдалось значительного влияния на уровень гомоцистеина в сыворотке крови или концентрации фолатов в течение четырех менструальных циклов. Может иметь минимальный антивоспалительный эффект при пероральном приеме, который теоретически снижает риск атеросклероза в течение длительного времени. Эффекты кажутся значительно меньше, чем для многих других пищевых добавок.

При приеме 80 мг изофлавонов Клевера красного ежедневно в течение 90 дней женщинами с менопаузой, несмотря на улучшение симптомов менопаузы, не удалось обнаружить влияния на артериальное давление, и это было отмечено в дальнейших исследованиях¹²⁾, но могло не применяться к пациентам с диабетом II типа, так в одном исследовании с участием женщин с постменопаузой и диабетом II типа прием 50 мг изофлавонов ежедневно в течение четырех недель был способен снижать систолическое (на 8 мм рт.ст.) и диастолическое (на 3,4 мм рт.ст.) артериальное давление по сравнению с контрольным значением. Снижение артериального давления было единственный раз отмечено у пациентов с диабетом, но второй раз не удалось наблюдать этот эффект у пациентов без диабета, даже при приеме женщинами с менопаузой. Увеличение податливости сосудистых стенок (упомянутое в разделе «Кровообращение») может иметь место без изменения артериального давления.

Уровень триглицеридов был слегка снижен через 90 дней у женщин с постменопаузой при приеме 80 мг изофлавонов (9%, хотя увеличивался при приеме плацебо), этот результат повторился в других исследованиях в той же степени у женщин с постменопаузой (9,7%), но не удалось обнаружить влияния на выборку пожилых мужчин, принимавших добавку в той же дозировке¹³⁾, или у женщин в пременопаузе, принимавших 80 мг в течение трех менструальных циклов. В одном исследовании, отмечающем небольшое снижение уровня триглицеридов, едва достигая статистической значимости (снижение на 9,7%), отмечается, что результаты были значительно выше при контроле над женщинами с исходным уровнем триглицеридов 178 мг/дл; снижение наблюдалось при приеме 40 мг промензила два раза в день (33%). Большинство данных в настоящий момент времени не поддерживает значительное снижение концентрации триглицеридов при пероральном приеме экстракта Клевера красного женщинами с менопаузой, хотя у женщин с очень высоким уровнем триглицеридов на начало исследования (исходное значение), возможно, имело место более релевантное снижение, чем такое, которое требует дополнительных исследований.

Биоханин A сигнализирует посредством одной подгруппы эстрогеновых рецепторов (эстрогеновые рецепторы α) для индуцирования синтеза мРНК аполипопротеина A1 (достигая 600% от контрольного значения) с активностью при концентрации всего лишь 500 нМ и максимальном эффекте при 10 µМ, дозировка 500-1000 нМ биоханина A была сравнима по эффективности с потенциалом 1 нМ 17β-эстрадиола (выше на 300% от контрольного значения). Это сигнализирование зависело от эстрогеновых рецепторов α (альфа), поскольку результаты повторились при исследовании на клетках HepG2 для экспрессии данного рецептора (который в норме не экспрессируется), в то время как при экспрессии только эстрогеновых рецепторов β не удалось получить ответ на биоханин A¹⁴⁾. Этот механизм также наблюдается для генистеина, метаболита биоханина A. Известно, что эстрогенная сигнализация, которую биоханин A способен активировать, увеличивает транскрипцию аполипопротеина A1, который, как считается, обладает кардиозащитным механизмом. При пероральном приеме 40 мг изофлавонов (биоханин A и формононетин в соотношении 3,5:1) два раза в день в течение шести недель отмечалось снижение уровня холестерина ЛПНП на 9,5% у мужчин, но не у женщин, хотя в данном исследовании отмечается, что исследуемая группа имела тенденцию (незначительную) к увеличенной исходной концентрации ЛПНП у мужчин. При той же дозировке в других исследованиях не удалось обнаружить влияния на уровень ЛПНП, ЛПВП и общего холестерина у женщин в менопаузе через 90 дней до года, также отсутствие эффекта отмечалось у женщин в пременопаузе, принимавших пищевую добавку в течение трех менструальных циклов, где не было оказано влияния на все подгруппы ЛПВ (ЛПВП, ЛПВП2 и ЛПВП3), а также аполипопротен A. Один раз отмечалось снижение уровня аполипопротеина A у женщин с менопаузой с избыточным весом, но не у лиц с нормальным весом, при приеме пищевой добавки с содержанием экстракта Клевера красного (MF11RCE) в дозировке 80 мг в течение 90 дней¹⁵⁾. Было проведено несколько исследований с положительными результатами по изучению приема пищевой добавки с содержанием экстракта Клевера красного, но они, как правило, представляют собой маломощные пилотные исследования или в них отсутствует контрольная группа с плацебо, несмотря на проведение слепого исследования, только в одном исследовании присутствовала слепая контрольная группа, отмечая увеличение ЛПВП (18,1%). При рассмотрении хорошо контролируемых исследований с положительными результатами, в одном исследовании, проводимом в течение одного года с участием женщин с менопаузой, не имеющих иных заболеваний, принимающих 40 мг изофлавонов один раз в день, отмечалось увеличение на 21% уровня ЛПВП в течение трех месяцев, что продолжалось с тем же эффектом в течение года приема добавки, а в другом исследовании (в котором не удалось наблюдать увеличение ЛПВП) отмечалось улучшение уровня ЛПНП и общего холестерина только у женщин с менопаузой и избыточным весом¹⁶⁾. У женщин с высоким уровнем холестерина (от слабого до умеренного; 5-9 мМ) при приеме добавки с содержанием изофлавонов Клевера красного в дозировке 40-80 мг в течение 12 недель после подготовительного периода четыре недели отмечалось, что прием добавки не смог снизить уровень биомаркеров холестерина по сравнению с контрольным значением. Существуют весьма разнообразные результаты при рассмотрении влияния пищевой добавки с содержанием Клевера красного на уровень холестерина, в настоящее время может наблюдаться возможное увеличение уровня ЛПВП (впрочем, результаты недостоверны относительно факта появления эффекта и его степени), в то время как уровень ЛПНП может только быть снижен, и проявляться слабый эффект у мужчин или женщин с менопаузой с избыточным весом/ожирением. Тогда как польза в настоящий момент еще не изучена, Клевер красный не может считаться оптимальной добавкой для лечения избыточного уровня холестерина.

В то время как у женщин в пременопаузе, не имеющих иных заболеваний, влияние пищевой добавки с содержанием Клевера красного на резистентность к инсулину отсутствует при приеме 80 мг в течение трех менструальных циклов, а изофлавоны в целом (обычно относящиеся к изофлавонам сои, имеют тенденцию быть связанными с уменьшением резистентности к инсулину через три месяца, прием 40-80 мг экстракта Клевера красного (промензил) ежедневно женщинами с менопаузой был связан со снижением чувствительности к инсулину по оценке количественного индекса контроля чувствительности к инсулину через три месяца (несмотря на контроль инсулин-сенсибилизирующих эстрогеновых пэтчей, без влияния изофлавонов на уровень гормонов)¹⁷⁾. При приеме пищевой добавки (50 мг изофлавонов, главным образом формононетина, ежедневно в течение четырех недель) не было отмечено влияния на уровень глюкозы в крови натощак, инсулина и HbA1c у пациенток с менопаузой и диабетом II типа. Изофлавоны (как класс химических соединений) могут иметь различные эффекты на чувствительность к инсулину, но было отмечено, что изофлавоны Клевера красного не имеют значительного влияния или могут снижать чувствительность к инсулину (увеличение резистентности к инсулину) при приеме пищевой добавки женщинами с постменопаузой.

При обработке изолированных стволовых клеток, полученных из жировой ткани, 100-1000 нМ биоханина в питательной среде в течение 12 дней отмечается снижение образования адипоцитов (на 33,6%) в зависимости от концентрации до 20,7-27,3%, что было обусловлено стимулированием дифференциации стволовых клеток, полученных из жировой ткани, в остеобласты с максимальной эффективностью при 300 нМ¹⁸⁾. В одном исследовании in vitro отмечается, что биоханин A может влиять на трансформацию стволовых клеток из липоцитов и в направлении клеток костной ткани, предполагая потенциальную длительную пользу для костной и жировой массы. Этот механизм наблюдается для многих флавоноидов и фенолов, практическое значение при пероральном приеме неизвестно.

Поскольку жировая масса per se измеряется не часто, общий вес был измерен в многочисленных исследованиях по изучению приема пищевой добавки с содержанием экстракта Клевера красного женщинами с менопаузой; наблюдалась общая неспособность экстракта Клевера красного снижать вес у этих участников исследования даже при приеме добавки в максимальной дозировке (80 мг) в течение года¹⁹⁾. Пищевая добавка с содержанием экстракта Клевера красного незначительно снижает вес в любом исследовании, в котором вес фактически измерялся даже при приеме максимальной дозировки в течение года.

При общем изучении экстракта Клевера красного при приеме 6 мг/кг экстракта в виде пищевой добавки (MF11RCE; эквивалентно 240 мг для человека) отмечалось сохранение уровня эстрогена и способность сохранять костную массу и минеральную плотность по сравнению с контрольной группой после овариэктомии (эффективно нормализовано) и сохранять прочность кости; такое сохранение суммировалось со смесью бикарбонатов (частично бикарбонат натрия и карбонат калия) при уровнях выше нормы в рационе крыс, и в дальнейших исследованиях было отмечено, что изофлавоны Клевера красного имеют больше пользы по сравнению со смесью бикарбонатов (для снижения кислотности). При пероральном введении 10 мг/кг формононетина крысам после овариэктомии в течение четырех недель отмечалось ослабление потери диаметра большеберцовой кости (7,4%) и бедренной кости (5,3%) без влияния на длину кости, и способность улучшения механических свойств путем улучшения максимальной и разрушающей нагрузки (силы, необходимой для перелома кости), хотя с меньшей эффективностью, чем для референтного препарата 17β-эстрадиола (200 µг/кг)²⁰⁾. При изучении исследований на грызунах наблюдается увеличение прочности кости по сравнению с контрольной группой с менопаузой (после овариэктомии) с эффективностью меньшей, чем для эстрогена в качестве референтного препарата. Известно, что пищевые добавки с содержанием изофлавонов стимулируют рост кости у женщин с менопаузой, и при изучении приема 40 мг промензила два раза в день в течение 12 недель женщинами с менопаузой, не имеющими иных заболеваний, не удалось отметить значительного влияния на уровень остеокальцина в крови или N-Tx в крови, что предполагает отсутствие влияния на ремоделирование кости. В то время как при приеме другого коммерческого препарата с преобладанием формононетина (римостил) было отмечено увеличение минеральной плотности кости через шесть месяцев приема на 3-4,1% (в дозировке 57-85,5 мг ежедневно) в слепом предварительном исследовании, также не удалось отметить значительного влияния на уровень остеокальцина и N-Tx ранее в контролируемых исследованиях. В одном исследовании по измерению костной массы во время менопаузы отмечается, что прием пищевой добавки в дозировке 40 мг с содержанием изофлавонов (промензил) ослаблял потерю минеральной плотности костей поясничного отдела позвоночника через год (снижая потерю на 1,86% в потере 1,08%), хотя влияние на плотность костей тазобедренного сустава и содержание минеральных веществ отсутствовало²¹⁾. Это не было связано с изменениями уровня биомаркеров в сыворотке крови, таких как N-терминальный пропептид проколлагена I типа или щелочная фосфатаза, что незначительно отличалось между группами. В исследованиях с участием человека была обнаружена незначительная польза для костей поясничного отдела позвоночника, но не для тазобедренного сустава; в большинстве исследований средней длины не удалось обнаружить изменений уровня биомаркеров, которые указывают на рост кости, долгосрочные исследования отсутствуют. В настоящий момент антиостеопоретический эффект кажется весьма незначительным, вероятно, главным образом из-за формононетина (обнаруженного в других растениях, таких как Астрагал перепончатый, Лакрица или Пуэрия лопастная).

Существует три типа рецепторов, известных как «рецепторы, связанные с эстрогеном», состоящие из изоформ эстрогеновые рецепторы α, β и γ; эти рецепторы стероидных гормонов имеют большое структурное сходство с эстрогеновыми рецепторами, но не активируются эндогенными эстрогенами (они постоянно активны без лиганда²²⁾). Эти рецепторы имеют меньший связывающий карман для лиганд, чем эстрогеновые рецепторы, и они могут реагировать на некоторые флавоноиды, такие как биоханин A, который активирует все три подгруппы (10 µМ) с эффективностью, лишь немного превосходящей дайдцейн (один из флавоноидов сои) путем увеличения способности связывания относящихся к эстрогену рецепторов с коактиватором PNRC. Считается, что рецепторы, связанные с эстрогеном, вовлечены в сигнализацию эстрогена (не определено, каким образом), поскольку рецепторы α и γ отрицательно и положительно связаны с надежными биомаркерами в клетках рака молочной железы соответственно. Хотя роль рецепторов, связанных с эстрогеном, в организме человека не полностью определена, биоханин A является агонистом всех трех подгрупп с эффективностью, сравнимой с дайдцейном. При изучении степени сигнализирования эстрогена промензил в изолированных клетках BT-474 был способен сигнализировать с помощью эстрогеновых рецепторов при использовании 10-кратного разбавления (от базового раствора), имел слабый эффект при 100-кратном разбавлении и отсутствие эффекта при 1000-кратном разбавлении. Изолированный ирилон, минимальный катехиновый изофлавон, обладает эстрогенными свойствами in vitro²³⁾. Предполагается наличие прямого эстрогенного эффекта на человека, поскольку при пероральном приеме пищевой добавки с содержанием 80 мг изофлавонов Клевера красного в течение 90 дней у женщин с менопаузой наблюдалось улучшение вагинальной цитологии, в том числе кариопикноза, кератинизации и показателя зрелости палочкоядерных гранулоцитов, что указывает на эстрогенный эффект. Отсутствие эффекта наблюдалось при проведении других исследований и при измерении плотности молочных желез (другой биомаркер эстрогенного эффекта in vivo) эффект отсутствовал для целой группы при приеме 40 мг промензила в течение от одного до трех лет²⁴⁾, хотя возможен минимальный антиэстрогенный эффект, связанный с уменьшением плотности молочных желез у женщин при суперэкспрессии эстрогеновых рецепторов (генотип ESR1), но необязательно у женщин с раком молочных желез в семейном анамнезе. Несмотря на вышеприведенные исследования (с использованием экстракта Клевера красного в виде препарата Промензил), при приеме другого экстракта, известного как Менофлавон, отмечался эстрогенный эффект на вагинальную ткань в эквивалентной дозе (80 мг ежедневно), хотя данное исследование спонсировалось производителями Менофлавона, а в другом исследовании (независимом) с использованием данного экстракта фактически было обнаружено снижение толщины эндометрия, не связанное с изменениями уровня эстрогена, и увеличение уровня тестостерона на 22%²⁵⁾. Вероятно, изофлавоны Клевера красного могут иметь прямое эстрогенное действие после перорального приема человеком. У женщин с постменопаузой, получавших 80 мг изофлавонов Клевера красного ежедневно в течение 90 дней, не наблюдалось значительного влияния на концентрацию 17β-эстрадиола в крови по сравнению с плацебо, такое отсутствие влияния наблюдалось при проведении дальнейших исследований и при приеме 40 мг курсом от трех месяцев до года. Несмотря на вышеупомянутую эстрогенность, отсутствуют значительные изменения концентрации эстрогена в крови у женщин с менопаузой, принимавших экстракт Клевера красного.

При проведении исследования in vitro промензил проявил антиандрогенное действие (63% при инкубации с 10-кратно разбавленным базовым раствором) без существенного агонистического действия²⁶⁾; промензил не вступал во взаимодействие с рецепторами прогестерона. У женщин с менопаузой, принимавших 80 мг изофлавонов Клевера красного ежедневно в течение 90 дней, не наблюдалось значительного влияния на уровень тестостерона по сравнению с плацебо, что было отмечено при приеме 40-80 мг в течение аналогичного периода времени в других исследованиях. В одном длительном исследовании при приеме MF11RCE в дозировке 40 мг два раза в день отмечалось увеличение концентрации тестостерона у женщин с менопаузой на 22%, что было связано с меньшим снижением уровня лютеинизирующего гормона, наблюдаемом при приеме плацебо, но без изменений других гормональных параметров. Преимущественно не оказывает влияние на уровень тестостерона, хотя в одном исследовании с использованием MF11RCE (который считается гормональным препаратом по некоторым неизвестным причинам) было отмечено увеличение уровня тестостерона у женщин при приеме пищевой добавки; это не считается достаточным доказательством в поддержку применения данной пищевой добавки либо для снижения уровня тестостерона, либо для нормализации его на фоне ингибирования ароматазы.

У женщин с менопаузой, принимавших 80 мг изофлавонов Клевера красного ежедневно в течение 90 дней, влияние на фолликулостимулирующий гормон отсутствовало.

У женщин с менопаузой, принимавших 80 мг изофлавонов Клевера красного ежедневно в течение 90 дней, влияние на концентрацию лютеинизирующего гормона в сыворотке крови отсутствовало.

Инсулиноподобные факторы роста некоторым образом вовлечены в патологию рака толстой кишки, поскольку они в основном стимулируют рост нормальных и раковых клеток²⁷⁾, и более высокий уровень инсулиноподобных факторов роста в крови наблюдался у лиц с раком толстой кишки по сравнению со здоровой контрольной группой, и тогда как большинство связывающих протеинов (IGFBP-3, изолирует до 90% связанных инсулиноподобных факторов роста) не имеет такого действия, имеют место менее активные IGFBP-1 и IGFBP-2²⁸⁾. В одном пилотном исследовании с участием женщин, не имеющих иных заболеваний, отмечалось, что для Клевера красного (промензил, капсулы 40 мг два раза в день в течение месяца) наблюдалась незначительная тенденция к снижению концентрации IGF-1 у женщин в пременопаузе, что не было характерно для всей группы (в том числе женщин с менопаузой), и не было оказано влияния на связывающие белки (IGFBP-1 и IGFBP-3). В исследовании по изучению приема капсул промензила (40 мг) утром и днем в течение восьми недель мужчинами с раком толстой и прямой кишки в семейном анамнезе не удалось обнаружить изменения уровня инсулиноподобных факторов роста (свободного IGF-I, общего IGF-II и протеинов, связывающих инсулиноподобные факторы роста, 1-3) при оценке целой группы, но у мужчин, обозначенных как производители эквола (23% выборки) наблюдалось увеличение на 15,1% общего количества IGF-1 (в диапазоне 4,1-27,2%). Уровень инсулиноподобных факторов роста в сыворотке крови отрицательно коррелирует с экволом, но не с генистеином, и в других исследованиях в выборке женщин с раком толстой и прямой кишки в семейном анамнезе все еще наблюдалась неспособность при приеме 40 мг промензила два раз в день влиять на уровень инсулиноподобных факторов роста в крови или связывающих их протеинов, с подтверждением, что уровень мРНК инсулиноподобных факторов роста в тканях толстой кишки аналогично не испытывал влияния, но существует большая вариация между данными уровня IGFBP-2, и тогда как в этом исследовании не измерялась выработка эквола, в других исследованиях отмечается позитивная корреляция с другими связывающими факторами, такими как IGFBP-3. Снижение общей концентрации инсулиноподобных факторов роста в сыворотке крови или увеличение уровня двух из связывающих протеинов (IGFBP-1 и IGFBP-2) считается защитой от рака толстого кишечника, но при приеме экстракта Клевера красного не удалось обнаружить влияния на эти биомаркеры у пациентов обоего пола. Вероятно, может присутствовать некоторое взаимодействие со статусом выработки эквола, что требует проведения дополнительных исследований.

Известно, что УФ-облучение увеличивает активность смешанной линейной киназы 3 (MLK3), которая затем действует с помощью пути метаболизма MKK4/JNK/c-Jun, а также MKK3/6/p38/MSK1 (посредством независимой фосфориляции MKK4 и MKK3/6) для стимулирования воспаления и апоптоза; вероятно, биоханин A является прямым ингибитором MLK3 и может предотвращать ее повышенную активность в ответ на УФ-облучение путем блокирования его участка связывания АТФ²⁹⁾. Биоханин A, вероятно, непосредственно действует на MLK3 и предотвращает ее воспалительный ответ на УФ-облучение в виде воспаления кожи. Было отмечено, что биоханин A обладает свойствами ингибирования меланина in vitro путем подавления меланогенеза в клетках B16 в диапазоне 11-22 µМ, что способно нормализовывать меланогенез до контрольного уровня, эффект сравним с 400 µМ арбутина. Такое действие не связано с ингибированием тирозиназы (что частично проявлялось только при 22 µМ), результат был повторен для формононетина. Биоханин A и формононетин оба продемонстрировали свойства депигментирования in vitro при 88-176 µМ с эффективностью, сравнимой с 400 µМ арбутина, и при испытаниях на мышах, получавших местно крем с содержанием 2% биоханина A два раза в день в течение одной недели, показало свойства отбеливания кожи. Вероятно, обладает свойствами отбеливания кожи при проведении исследований in vitro на мышах, имеет достоверный потенциал на основании ограниченных доказательств данного эффекта. Пероральный прием 80 мг изофлавонов Клевера красного ежедневно в течение 90 дней был связан с улучшением субъективной оценки качества кожи (содержание влаги, текстура и общее состояние по 100-балльной визуальной аналоговой шкале оценки). Наблюдалась высокая вариабельность, но общее улучшение достигло 17,7-18,6 пунктов (по шкале от 0 до 100), тогда как при использовании плацебо отмечалось улучшение на 5,0-6,2 пункта. Как минимум в одном исследовании отмечалось улучшение качества кожи после курса приема пищевой добавки в течение девяноста дней женщинами с менопаузой.

При пероральном приеме 80 мг экстракта Клевера красного ежедневно в течение 90 дней женщинами с менопаузой наблюдалось увеличение качества волос по результатам самооценки (толщина, ломкость и общее качество) по оценке по шкале от 0 до 100, где улучшение отмечалось между 6,3-7,3 пунктами (плацебо 0,2-4,2), но с большой вариабельностью.

Прием пищевой добавки с содержанием 80 мг экстракта Клевера красного ежедневно в течение 90 дней женщинами с постменопаузой был связан с увеличением субъективной оценки относительно качества ногтей во второй половине исследования (данное исследование было двойным слепым перекрестным исследованием), достигая увеличения 10,8 ± 19,3 пункта (по шкале от 0 до 100), хотя только в первой группе, принимавшей добавку, отмечалась тенденция к увеличению субъективной оценки.

Прием пищевой добавки с содержанием 80 мг изофлавонов Клевера красного снижает симптомы менопаузы через 90 дней по оценке индекса Куппермана на 78%, в то время как при плацебо наблюдается снижение на 23% за тот же период времени; в аналогично структурированном исследовании с использованием 80 мг изофлавонов отмечалось снижением симптомов менопаузы по оценке индекса Куппермана (75,4%), а также приливов и ночной потливости (72,2-73,5%) по сравнению с плацебо, и эта польза не наблюдалась через три месяца после отмена приема пищевой добавки. При приеме 40 мг изофлавонов Клевера красного ежедневно в течение двенадцати недель было отмечено снижение приливов при оценке на четвертой неделе, но после проведения полного исследования не удалось обнаружить снижения симптомов менопаузы или приливов по сравнению с плацебо, такое отсутствие эффекта затем было повторно отмечено при использовании 40-160 мг промензила и при оценке приливов (снижение на 29-34%, для плацебо на 35%) или общих симптомов (снижение на 26-44%, для плацебо 46%). При приеме промензила в данной дозировке (40 мг) в течение года не наблюдалось защитного эффекта даже при контроле изофлавонов в моче или генотипа (CYP19, CYP17, ESR1), и при приеме изофлавонов Клевера красного в дозировке 40-120 мг в других исследованиях не удалось обнаружить этот эффект через год, где снижение симптомов было аналогично использованию плацебо (по индексу Куппермана)³⁰⁾. Когда использовался коммерческий препарат промензил (изофлавоны Клевера красного вместе с изофлавонами сои), и при приеме пищевой добавки в дозировке 80 мг наблюдалась способность снижения приливов на 33% (для плацебо без изменений) в течение трех недель, достигая снижения на 44% через 12 недель. В целом симптомы менопаузы по шкале выраженности климактерического синдрома Грина (снижение на 12,8%) были улучшены по сравнению с плацебо, хотя это не отмечалось в других исследованиях с использованием той же дозировки и временных рамок. В одном исследовании отмечается что, несмотря на общую пользу к концу 12-й недели приема пищевой добавки в дозировке 80 мг промензила, наблюдалось быстрое снижение приливов на начальных стадиях исследования только при приеме добавки³¹⁾; в другом исследовании с подготовительным периодом приема плацебо в течение 4 недель до приема пищевой добавки промензил отмечалось, что ожидаемое снижение возникало через 1-3 недели (33% от исходного значения, больше чем для плацебо), предполагая кратковременный эффект, который ослабевал со временем. В других исследованиях, в то время как во многих исследованиях отмечается возможность пищевой добавки увеличивать уровень изофлавонов в моче, и такое увеличение различается между участниками, уровень изофлавонов в моче может коррелировать с индивидуальной пользой; вместо этого участники с избыточным весом более вероятно ощущали пользу. В то время как в отдельных исследованиях отмечается польза в лечении симптомов менопаузы (обычно либо при оценке общих симптомов по шкале, либо при оценке частоты/величины приливов путем ведения отдельных протоколов) в целом такая польза считается недостоверной по величине и частоте. Многие исследования также частично финансировались производителями коммерческих продуктов, при этом частота отсутствия эффекта имела тенденцию к увеличению в независимых исследованиях, так в настоящий момент целесообразным считается полагать, что существует минимальная польза или польза в лечении общих симптомов менопаузы вовсе отсутствует.

Клевер красный (в виде чая или настойки) имеет традиционное применение при лечении кашля и бронхита, и при исследовании на изолированной трахее морской свинки 10-30 µМ биоханина A снижали сокращения, вызванные овальбумином, при IC50 8,1 ± 0,8 μМ, это может быть связано с его ингибирующим действием на фосфодиэстеразу (PDE) 4 (IC50 8,5 μМ), что имеет больший эффект про сравнению с его ингибирующим действием на PDE1 (29,1 μМ) и PDE2 (27,9 μМ; без влияния на PDE3 и PDE5), что отличает его от генистеина (большая селективность в отношении PDE2) и дайдцейна (селективность в отношении PDE3). Интересно, что пока активность PDE4 ингибируется при IC50 8,5 μМ, все еще незначительно смещая результаты для ролипрама от PDE4 до 300 μМ, результат для PDE4H/PDE4L составляет более 35 (что считается желательным соотношением для лечения астмы). Клевер красный, в частности биоханин A, обладает некоторыми противоастматическими свойствами в легких, действуя в качестве бронходилататора (расширяя бронхи и усиливая дыхание). Пероральное введение 100 µМ/кг биоханина A (но не 30 µМ/кг) мышам способно значительно подавлять гиперреактивность дыхательных путей, вызванную метахолином, что связано со снижением инфильтрации воспалительных клеток и общих воспалительных цитокинов за исключением интерферона-γ. При пероральном введении грызунам было отмечено снижение гиперреактивности дыхательных путей.

Было отмечено, что биоханин A является ингибитором ароматазы (что, как считается, имеет терапевтическое значение для лечения рака молочной железы за счет чувствительности к эстрогену³²⁾) и в раковых клетках молочной железы MCF-7aro, инкубированных с биоханином A за день до введения андрогенов, пролиферация (за счет преобразования андрогенов в эстрогены) подавлялась при введении 12,5 µМ биоханина A и восстанавливалась при 25 µМ. Было отмечено, что биоханин A пролиферирует раковые клетки молочной железы MCF-7 при EC50 9 нМ в меньшей степени, чем 17β-эстрадиол (4 пМ), но в большей, чем генистеин (32 нМ). Биоханин A продемонстрировал и эстрогенные и антиэстрогенные свойства на изолированных клетках MCF-7, но эстрогенные свойства возникают при низких концентрациях и могут быть более практически релевантными пероральному приему. В одном предварительном исследовании у женщин без злокачественных опухолей, принимавших пищевые добавки с содержанием изофлавонов в течение одного года, не наблюдалось плотности молочных желез, что указывает на эстрогенный эффект, и когда результаты повторились для экстракта Клевера красного, было отмечено, что при приеме 40 мг промензила ежедневно в течение одного года не удалось обнаружить эстрогенных или антиэстрогенных свойств в тканях молочной железы; при контроле изофлавонов в моче (маркер всасывания) не удалось выявить значительного влияния, но при изучении только с участием женщин с генотипом ESR1 (эстрогенный рецептор, когда увеличение содержания рецепторов может быть немного связано с увеличенным риском³³⁾, и пищевая добавка с содержанием изофлавонов обладала минимальным антиэстрогенным эффектом по сравнению с плацебо), отмечалось взаимодействие, в то время как генотипы CYP17 и CYP19 не были связаны. В целом, вероятно, отсутствуют эстрогенные или антиэстрогенные эффекты на ткани молочной железы у женщин с менопаузой без рака молочной железы в анамнезе, хотя может проявляться незначительный антиэстрогенный эффект, в частности, у женщин с высоким уровнем эстрогеновых рецепторов (генетически).

Изофлавоны Клевера красного защищают дофаминэргические нейроны от воспалительных неврологических повреждений (вызванных ЛПС), с наибольшей эффективностью пратензеина, который предотвращает 80,2% усвоения дофамина (снижается до 37,2% только при действии ЛПС) при концентрации 2,5 μМ; это увеличивает потенциал формононетина (60,7%) и дайдцейна (70,1%), в других исследованиях биоханин A был способен предотвращать 88,7% усвоения дофамина по сравнению с контрольным значением. Фактически 250 нМ биоханина A способны увеличивать усвоение дофамина (36,7% в контрольной группе с ЛПС) до 55,9%, минимальный, но статистически значимый защитный эффект, который был отмечен в микроглии при 2,5 μМ для всех изофлавонов путем ослабления высвобождения воспалительных цитокинов. У крыс с очагами поражения 6-гидроксидофамина (дофаминэргических) прием пищевой добавки в дозировке 200 мг/кг экстракта Клевера красного (26% формононетина и 12% биоханина A) в течение четырех дней до возникновения поражений снижал размер очага поражения и в меньшей степени уровень дофамина. Предварительные данные исследований in vitro и на крысах, получавших дозировку, превышающую нормальную, экстракта Клевера красного (около 2 г для человека с нормальным весом) было отмечено минимальное защитное действие против повреждения дофаминэргических нейронов (выбрасывающих дофамин), считается, что это обусловлено общими антиоксидантными и антивоспалительными свойствами.

:Tags

Читать еще: Гонадотропин-рилизинг гормон , Остролодочник серповидный , Цистеин , Эпокрин/Эпрекс (эпоэтин альфа) ,