Олеамид

Олеамид является производным олеиновой кислоты (основная группа жирных кислот омега-9, главного компонента оливкового масла), входящей в подгруппу азота. Он играет роль в естественных процессах, связанных со сном. Инъекции олеамида вызывают сон и активируют те же самые рецепторы, что и марихуана.

• Другие названия: Церебродиен.
• Не путать с олеиновой кислотой (производным данных жирных кислот является олеамид).

Олеамид (цис-9,10-октадеценовая кислота) – это молекула, которая вырабатывается эндогенным путём из олеиновой кислоты (жирные кислоты омега-9, которые чаще всего ассоциируются с оливковым маслом). Впервые была выделена из сыворотки человека в 1989 году. Олеамид накапливается в цереброспинальной жидкости при нехватке сна. Если уменьшить стандартный сон на 6 часов, то содержание олеамида в цереброспинальной жидкости увеличится в 4-7 раз. Олеамид встречается в организмах практически всех живых существ. Вне эндогенного синтеза олеамид был найден в:

• Зизифусе настоящем

Олеамид - метаболит олеиновой кислоты естественного происхождения. Он вовлечён в процессы сна в качестве нейропептида. Также используется как седативное средство в традиционной китайской медицине.

Под олеамидом обычно подразумевают цис-олеамид и его транс-изомеры, которые не способны передать многочисленные биологические воздействия щелевым контактам, серотониновым- (5-HT2A и 5-HT2C) и ГАМКа-рецепторам. Наблюдается ограниченное воздействие на 5-HT1A рецептор, примерно половинное воздействие в качестве цис-изомера, а инъекции транс-изомеров имеют в половину меньше воздействия, чем цис-изомеры.

Олеамид синтезируется на срезах мозга, инкубированных с олеиновой кислотой и аммиаком при помощи ферментов, так как процесс кипения срезов мозга (способствующий денатурации ферментов) останавливает синтез. Олеамид может быть превращён в олеиновую кислоту с помощью мембранного фермента гидролазы амида жирных кислот, это тот же фермент, который находится в метаболитах анандамида (этаноламид арахидоновой кислоты) и в биологически активных веществах марихуаны. Интересно то, что в процессе ингибитации этого фермента, ингибитируется и синтез олеамида (клетки мыши N18TG2), однако точный процесс биосинтеза еще не определён. Известно, что олеиновая кислота превращается в олеоил-КоА, а затем в N-олеоилглицин, где окислительное расщепление N-олеоилглицина создаёт олеамид с помощью ферментов пептилглицин-альфа-амидирующей монооксигеназы. Следует заметить, что среднее звено N-олеоилглицин тоже является биологически активным. Олеамид также синтезируется в человеческом теле (он был замечен в циркуляции) из олеиновой кислоты и аммиака. Хотя ферменты биосинтеза еще полностью не охарактеризованы, олеамид разлагается с помощью гидролазы амида жирных кислот, так как входит в группу жирных кислот.

4 часа инкубации при 37 градусах по Цельсию не причиняют структуре олеамида вреда, хотя внедрение жёлчных кислот способно ускорить процессы метаболизма и разрушить 95 процентов олеамида при тех же условиях.

Базальный уровень сыворотки олеамида в человеческом организме равен примерно 31.7мкг/мл (110мкм) или же ниже (9.9 мкг/л (35нм) и 16мкг/л (56нм)). В клетках мышиной нейробластомы концентрация олеамида достигает 1.5 мкг/109 клеток.

Анандамид активизирует рецептор капсаицина (TRPV1), но его взаимосвязь с олеамидом неизвестна. Приём антагониста рецептора капсаицина (капсаицин) не изменяет поведенческих последствий олеамида. Возможно, что олеамид способен активизировать рецептор капсаицина, но практическое значение этого неизвестно. Известно, что олеамид ингибитирует перенос красителя между выделенных глиальных клеток, экспрессирующих α1-коннексин и клеток, экспрессирующих β1-коннексин с максимальной эффективностью на уровне 50мкм, но не ингибитирует распространение волны Ca2+. Данное распространение успешно блокируется 18β-глицирризиновой кислотой (биологически активным веществом лакрицы), классическим ингибитор щелевых контактов. Не установлено, происходят ли данные явления в организме, так как для этого необходимо большая концентрация олеамида. Если они происходят, то они могут являться приличной очень слабого противоэпилептического действия. Возможно, что олеамид является ингибитором щелевых контактов, но в очень высоких дозах. Его практическая значимость в этом вопросе еще не изучена. Олеамид взаимодействует с натриевыми каналами в нейронах (натриевые каналы высокого потенциала важны для нейронного потенциала действия), так как он может блокировать деполяризацию (вызванную вератридином), не затрагивая сигнальной трансдукции калия (при IC50 = 13.93мкм), а также уменьшать спайки в поступлении кальция, не влияя на базальную концентрацию. Ингибитирующее воздействие также оказывается на батрахотоксин А (по каналам, чувствительным к тетродотоксину), и из-за возросшей диссоциации не влияет на константу ассоциации. Считается, что олеамид аллостерически модулирует каналы. Необходимый уровень концентрации (3.2-64мкм) совпадает с тем, на котором происходит активация ГАМК- и глицинового рецепторов, из чего следует, что олеамид может проявляться в качестве депрессанта. Цис-олеамид также подавляет повторяющиеся устойчивые возбуждения при EC50 = 4.1мкм. Принято считать, что это происходит из-за ингибирования натриевых каналов.

Воздействуя на 5-HT2A рецепторы, 10-300нм олеамида способны усилить сигнальную трансдукцию рецептора, индуцированного серотонином, с помощью гидролиза фосфоинозитидов, где 100нм вызывает 228 процентное улучшение эффекта сигнальной трансдукции, не влияя на саму сигнальную трансдукцию. Данное потенцирование было повторено на 5-HT2A (165-170% на 100-1000нм в другом исследовании). Результаты показали распространение эффекта на рецепторы 5-HT1A и 5-HT2C (360-570% на 100-1000нм) с концентрацией в 1нм, практически не оказывая никакого влияния на рецепторы 5-HT3. Олеамид не влияет на связывающие способности лигандов серотонина в 5-HT-рецепторах. Вышеназванный потенциирующий эффект видимо не связан с изменением уровнем EC50 серотонина (который не изменяется), но, вероятно, происходит с помощью улучшения пост-эффекта сигнальной трансдукции, не имея влияния на связывающие способности серотонина. Кроме того, все эти эффекты в значительной степени связаны с ненасыщенными жирными кислотами Омега-9, так как при превращении амидов жирных кислот омега-9 в омега-6, потенциирующие свойства становятся диаметрально противоположными, в то время как при насыщении – свойства исчезают. Олеамид сильно взаимодействует с серотониновыми рецепторами, усиливая сигнальную трансдукцию агонистов серотонина с помощью субпопуляций 2х рецепторов. Потенциал вышесказанного поразителен, так как сильного эффект можно добиться при весьма малой концентрации вещества. По всей вероятности олеамид является серотонинергическим синергистом. Воздействуя на 5-HT7 рецепторы, олеамид является агонистом при уровне EC50 = 4.2нм в отсутствии серотонина. Серотонин же имеет ЕС50 = 52нм, и, по-видимому, олеамид (в присутствии серотонина) является конкурентоспособным ингибитором, воздействующим на 5-HT7 рецептор (конкретно в качестве неоспоримого противодействующего средства). Эффект серотонина и олеамида вместе взятых на данный рецептор был ингибирован приблизительно на 65 процентов с помощью кетансерина, а олеамид оказался не связанным с 5-HT7 рецепторами в классическом сайте связывания. В отношении к другим субпопуляциям рецепторов, возможно присутствие конкурентоспособных антагонистичных свойств или же отсутствие существенного влияния. Предварительный приём флуоксетина или Фенфлурамина (ингибиторы обратного захвата серотонина) способен нейтрализовать сонливость, наблюдающуюся при приёме олеамида, так же, как и приём буспирона и 8-OH-DPAT, являющихся агонистами 5-HT1A, несмотря на то, что они не влияют на сам сон. WAY100635, противодействующий 5-HT1A, не усилил сонливости, возникшей из-за олеамида, но он блокировал воздействие других агентов, которые уменьшали сонливость (связанную с олеамидом). Селективные ингибиторы обратного захвата серотонина (СИОЗС) и агонисты 5-HT1A способны нейтрализовать возникшую из-за олеамида сонливость.

Олеамид, судя по всему, не связан с глутаминергическими рецепторами, включая НМДА-, АМРА- и метаботропные глутаминергические рецепторы. Взаимосвязь с глутаминергическими рецепторами и передача отсутствует.

Олеамид известен своей способностью улучшать процессы, зависящие от ГАМКА, при уровне в 3.2мкм, а также изменять их на диаметрально противоположные. Эта позитивная модуляция наблюдается только в присутствии цис-изомера олеамида, так как форма транс-изомера является неактивной. Несмотря на то, что рецепторы ГАМКА содержат подгруппы β1 (они могут быть нечувствительны к некоторым депрессантам), они по-прежнему позитивно модулируются олеамидом. Максимальный эффект на сигнальную трансдукцию ГАМКА достигается при 216+/-35% от начального уровня, а EC50 равен 28.94+/-1.4мкм, и как уже отмечалось, имеет двухкратное увеличение при меньших значениях ЕС50 (15мкм). Олеамид несущественно влияет на взаимосвязывающие способности лигандов и ГАМКА-рецепторов, а накопление ГАМК, в свою очередь, не сказывается на синаптосомах, подвергшихся воздействию. Олеамид улучшает сигнальную трансдукцию ГАМК, воздействуя на ГАМКА-рецепторы, не являясь при этом ни лигандом, ни затрагивая связывающие способности лигандов. Точный механизм, являющийся причиной данного усиления сигнальной трансдукции, неизвестен.

Олеамид оказывает позитивное воздействие на глициновые рецепторы так же, как и на ГАМК-рецепторы, с максимальным улучшением в 171% от начального уровня, ЕС50 = 22.12мкм, ЕС50 воздействия глицина на данный рецептор снижется с 322.2мкм на 239.4мкм. Олеамид улучшает глицинэргическую сигнальную трансдукцию.

Олеамид не обладает существенным взаимодействием с мускариновыми холинергическими рецепторами. Холин-ацетилтрансфераза (цитоплазмтический фермент синтеза ацетилхолина) активизируется олеамидом, и растением Зизифусом настоящим, из которого он получен. Возможно улучшить ацетилхолиновый синтез, хотя подобные процессы и не наблюдаются в живом организме, а олеамид не вступает в реакцию с ацетилхолиновыми рецепторами.

Механистически олеамид не имеет отношения ГАМКА-рецепторам, однако в было доказано in vitro, что он усиливает сигнальную трансдукцию, используя ГАМКА-рецепторы, которые также подвержены влиянию олеиновой кислоты (данное утверждение является спорным). Олеамид не оказывает воздействия на взаимосвязь ГАМК с ГАМКА бензодиазепиновыми рецепторами при концентрации до 50мкм. Олеамид напрямую не связан с ГАМК или безодиазепиновыми рецепторами, но он усиливает сигнальную трансдукцию рецепторов с помощью других агентов. Олеамид вероятно является ГАМК синергистом. Известно, что после внутривенной инъекции олеамида возникает сонливость, зависящая от уровня дозы, с сопутствующим уменьшением бодрости и латентного периода сна (времени, необходимого для погружения в сон), а также в зависимости от уровня дозы, уменьшается температура тела. Инъекции 25, 50 и 100мг/кг олеамида уменьшают латентный период сна на 13, 24 и 33 процента соответственно, в то время как доза в 200мг/кг имела 28 процентное уменьшение (зависимость от уровня дозы при данном уровне отсутствует). Во время теста открытого поля, ЭД50 (средняя эффективная доза) уменьшения движений была равной 17+/-1.5мг/кг, в очередном исследовании - ЭД50 было равно 10-19мг/кг. В других исследования уменьшение в движениях было замечено на уровне в 2.5мг/кг, а последующие инъекции поддерживали эффект в течение 60 минут (наибольшая эффективность достигалась после 30 минут), движения возвращались в норму после 2 часов после инъекции. Эффект, вызванный олеамидом, может быть уменьшен на 70 процентов, если заранее были введены 5HT1A антогонисты, частично обращённые (77 процентов) с помощью антогониста D2. Инъекции олеамида (в зависимости от дозы) вызывают уменьшение необходимого времени на погружение в сон, а также уменьшают двигательные функции испытуемых животных, и имеют высокую надёжность. Инъекции олеамида 25-200мг/кг, однако, не оказали практически никакого влияния на фазу быстрого сна крыс, меньшие дозы (2.5-20мг/кг) были тоже неэффективны, хотя и уменьшили латентный период сна. В одном исследовании удалось добиться увеличение фазы быстрого сна при помощи одноразовой инъекции, а также во время 15-дневного курса внутрицеребральных инъекций олеамида (25мкг), но при этом был использован наименее практичный метод исследования (оценивалась эффективность средства при пероральном приёме). Несмотря на то, что приём олеамида предполагает улучшение фазы быстрого сна, надёжных доказательств этого воздействия пока нет.

Механистически активатизация СВ1 рецептора известна тем, что он ухудшает долговременную потенциацию в гиппокампе, в то время как доза в 32мкм олеамида не способна повлиять на базальный уровень долговременной потенциации, было замечено, что она ухудшилась по сравнению со средним уровнем. Активизируя рецепторы СВ1, олеамид подавляет долговременную потенциацию. Инъекция олеамида дозировкой в 5мг/кг, произведённая мыши до начала задачи на пространственное обучение (Y-лабиринт), показало улучшение в обучении, которое не наблюдалось при дозировке в 10мг/кг. Если исключить тест на крысах, инъекции олеамида дозировкой в 30-50мг/кг способствуют угасанию памяти, не имея никакого действия на воспроизведение памяти после 24 часов после теста. Наблюдаемые в данном тесте эффекты характерны также и для каннабиноидов, включая анандамид. Так как эффект анандамида блокируется агонистами СВ1, считается, что данный рецептор способствует возникновению возможного амнестического эффекта олеамида. Он так же отрицательно влияет на быстродействующую память (как и анандамид), что усугубляется в случаях замедления распада олеамида. Олеамид имеет разностороннее воздействие на память: улучшение (в случае с пространственным обучением), и амнестический эффект (вспоминание и/или угасание памяти). 0.16-0.32% диеты на протяжении четырёх недель (мыши, в целом 14-16мг ежедневно), и олеамид способен немного уменьшить амнестический эффект скополамина. В олеамиде был замечен слабый анти-амнестический эффект против холинээргического яда.

Инъекции олеамида, произведённые крысам, привели к возросшему потреблению пищи в течение трёх часов.

Несмотря на то, что эндоканнабиноид анандамида приводит к переменам в сексуальном поведении, олеамид не оказал никакого воздействия на сексуальное поведение у крыс.

В исследовании социальных связей крыс в каскадном лабиринте, доза олеамида в 5мг/кг оказалась недостаточно высокой, чтобы повлиять на движения крыс, но оказала анксиолитический эффект.

Введение олеамида дозой 10мг/кг оказало анти-депрессивный эффект на мужскую особь крысы во время проведения теста на принудительное плавание, в то время как доза в 5мг/кг оказалось неэффективной. И ни 10мг/кг, ни 5мг/кг не оказало никакого действия на женскую особь крысы.

При приёме олеамида был замечен небольшой аналгетический эффект, но использованная доза в 10-75мг/кг оказалась недостаточно надёжной и сильной для проведения теста горячей пластинки на крысах, однако эффект был заметен во время теста на движение хвоста. Данный обезболивающий эффект длился в течение 60 минут, а при 50мг/кг (но не 30мг/кг) эффективность обезболивающего продлилось на час больше, после чего хвост крысы вновь стал чувствительным. Последнее исследование подтвердило недостаточную мощность олеамида в качестве обезболивающего средства для прохождения теста горячей пластинки для крыс. Так как тест на движение хвоста показывает действие спинального обезболивания, а тест горячей пластинки - супраспинального, предполагается, что алеамид имеет выборочный аналгетический эффект.

В мышинных микроглиальных клетках (невральных клетках), олеамид способен подавить активизацию, индуцируюмую липополисахаридами при дозе в 10мкм, и практически полностью ликвидировать активизацию микроглии при дозе в 100нм. Это, а также ликвидация образования активных форм кислорода (АФК) в клетках, возможно благодаря ингибированию трансактивации PI3K/AKT и NF-κB, уменьшенных с помощью канабиноидных рецептров (СВ2). Блокировка СВ2 рецепторов убирает противовоспалительные эффекты олеамида. Олеиновая кислота также обладает противоспалительным действием, но она слабее и не взаимодействует с рецепторами СВ2. Рецепторы СВ2 экспрессированы в микроглии, и, как было показано ранее, способствуют противоспалительным и нейропротективным эффектам в микроглии. Олеамид оказывает противоспалительный эффект за счёт воздействия на каннабиноидный рецептор 2 (СВ2), но для этого необходима его высокая концентрация. Олемид также препятствует взаимодействию агонистов (CP 55,940 и римонабант) с рецептором СВ1, не оказывая значительного эффекта на аффинность связывания СВ2. Наблюдается небольшая активизация рецептора СВ1 при олеамиде, но данную активизацию можно убрать с помощью ко-инкубации римонабанта. Всё это, однако, является спорным моментом, так как эти данные эффекты не имеют значения из-за необходимости использования высокой концентрации in vitro (10нм), что является недостижимым при пероральном приёме. Олеамид взаимодействует с рецептором СВ1, главный рецептор которого является промежуточным звеном психоактивных свойств марихуаны.

Олеамид был исследован на предмет возможных свойств, вызывающих привыкание, так как известно, что он улучшает сигнальную трансдукцию ГАМКА-рецепторов, что в свою очередь является фармакологическим эффектом бензодиазепиновых средств (эффект возникает из-за бензодиазепинового сайта связывания, а бензодиазепины прикрепляются на ГАМКА-рецепторах). Было проведено исследование воздействия олеамида в течение 10 дней (крысам давали 30мг/кг дважды в день), а потом внезапно его воздействие было прекращено. Но никакой зависимости найдено не было, абстинентный симптомы никак не проявлялись. Одновременный приём антагонистов СВ1 вызывает абстинентные симптомы при вышеупомянутой дозировке, но они гораздо слабее, чем от опиатов и анандамида. Приём олеамида в течение 15 дней, который был завершён внезапным прекращением, не оказал негативного воздействия на сон подопытных крыс, хотя улучшение быстрой фазы сна, которое наблюдалась при приёме олеамида, пропало. В данный момент нет доказательств тому, что олеамид вызывает привыкание, но из-за механизма его действия (улучшение сигнальной трансдукции ГАМКА) слабое привыкание теоретически возможно. Нужны более длительные исследования, и, возможно, большая доза олеамида.

Достоверно известно, что инъекции олеамида, вызывающие сон и гипотермию, никак не влияют на кровяное давление и сердечный ритм.

Олеамид индуциирует концентрацию и релаксацию, зависящую от эндотелия, в артериях (0.01-10нм) при ЕС50 = 350+/-260нм, олеиновая кислота и другие метаболиты гидролаза амидов жирных кислот не участвуют в наблюдаемой вазорелаксации. Данные наблюдаемые эффекты являются промежуточным звеном в части каннабиноидных рецепторов 1 (СВ1) и, не-СВ1/СВ2, антогонисте О-1918 (каннабиодный антогонист, который направленно взаимодействует с другими рецепторами), так же, как и в рецепторе капсаицина (антагонист, который частично ингибитируется эффектами олеамида). В клетках эндотелия, которые испытали воздействие агониста альфа-адренорецепторов, тоже можно наблюдать вазорелаксацию (ЕС50 равен 1.2мкм), но данные механизмы не связаны с рецепторами СВ1, а наоборот частично зависят от рецепторов касаицина и оксид азота. Олеамид обладает вазорелаксирующим действием, но его практическое воздействие на тело неизвестно. Учитывая его активность in vitro, данные эффекты, скорее всего, возможны и при пероральном приёме.

:Tags

Читать еще: Витамин K , Дроспиренон , Онкаспар (Пегаспаргаза) , Цефазолин , Эноксолон ,